Sant'Ana está sentada, em posição frontal, com a cabeça inclinada para a esquerda, e a menina está à sua direita, com a cabeça ereta e a parte superior do corpo levemente projetada para frente. Ambas seguram livro aberto sobre o colo de Sant'Ana, que envolve a filha com o braço direito. Os panejamentos são movimentados e apresentam-se em madeira aparente, uma vez que toda a decoração pictórica foi removida. A cabeleira da menina é comprida, em estrias e mechas. A cadeira tem espaldar alto, com remate superior arqueado e colunas terminadas em ponteiras. Na parte superior da almofada do encosto há um furo circular.