Sant'Ana está sentada, em posição frontal, com a cabeça ereta e o olhar dirigido para frente. Nossa Senhora menina está em pé, à esquerda da mãe, de perfil, com a cabeça erguida e o olhar direcionado para frente. Ambas seguram livro aberto sobre o colo de Sant'Ana, que envolve a filha com o braço esquerdo. Os panejamentos são bastante retilíneos, destacando-se o modestino de Sant'Ana, que se funde ao véu. A cabeleira da menina é resolvida em estrias, com mechas nas laterais. As carnações das figuras são muito claras, com círculos vermelhos sugerindo maquiagem. A cadeira, pintada de vermelho, não tem espaldar, resumindo-se a um banco com pernas arqueadas.