Sant'Ana está sentada, em posição frontal, com a cabeça levemente voltada para a esquerda. Nossa Senhora menina está em pé, à esquerda da mãe, de perfil, com a cabeça erguida e o olhar direcionado para frente. Ambas seguram livro aberto, voltado para a menina e apoiado sobre o colo de Sant'Ana, que envolve a filha com o braço esquerdo. Os panejamentos são movimentados, destacando-se a lateral esquerda do manto de Sant'Ana, curvo e bastante volumoso. A cadeira tem espaldar alto, com remate superior decorado com volutas e pingente central, e almofada de encosto pintada de vermelho. A base, em dois níveis, tem a forma de uma ferradura.