Sant'Ana está sentada, em posição frontal, com a cabeça erguida e o olhar direcionado para frente. Nossa Senhora menina está em pé, à esquerda da mãe, com o corpo enviesado e o olhar direcionado para frente. Ambas seguram livro aberto sobre o colo de Sant'Ana, que envolve a filha com o braço esquerdo. O rosto das duas figuras é marcadamente redondo. Os panejamentos contêm algum movimento, destacando-se o sulco diagonal na altura das pernas de Sant'Ana, que estão cruzadas. A cadeira, sem espaldar, resume-se a um banco de dois pés.