Sant'Ana está sentada, em posição frontal, com a cabeça levemente inclinada para a esquerda. Nossa Senhora menina está em pé, à esquerda da mãe, de perfil, com a cabeça erguida e o olhar direcionado para frente. Ambas seguram livro aberto sobre o joelho esquerdo de Sant'Ana, que envolve a filha com o braço esquerdo. Os panejamentos são movimentados, destacando-se sua coloração, com predomínio de tons amarelo, marrom, vermelho, verde, azul e branco. A cabeleira de Nossa Senhora é longa e trabalhada em estrias, com mechas nas laterais. A cadeira tem espaldar alto, e as duas pernas visíveis são sinuosas e frisadas.