Sant'Ana está sentada, em posição frontal, com a cabeça inclinada para a esquerda e o olhar dirigido para baixo. Nossa Senhora menina está em pé, à esquerda da mãe, de perfil, com a cabeça erguida e o olhar direcionado para frente. Ambas seguram livro aberto, virado para a menina e apoiado sobre o colo de Sant'Ana, que envolve a filha com o braço esquerdo. Os panejamentos são movimentados, destacando-se, sob a indumentária, a ponta do pé esquerdo de Sant'Ana, que pisa uma almofada. A cabeleira da menina, em estrias, é penteada e presa em coque na parte posterior da cabeça. A cadeira tem espaldar alto, com remate central em concha e frisos laterais em volutas.